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      技术支持

      你知道如何使用贝克曼DNA纯化试剂盒从动物组织中提取基因组DNA吗?
      发布时间:2022-01-19   点击次数:190次
         贝克曼DNA纯化试剂盒是根据氯化芐法构建的,能够从样本中提取基因组DNA的试剂盒。具有能将含有纤维素等的细胞壁中的羟基苄基化,从而破坏细胞壁的特性。本制品利用了这一特性,将植物样品冻结融解后,再使用PipetTip的将植物样品在Microtube壁上数次按压即可破坏细胞壁。本法与传统方法相比,省去了液氮研磨等烦琐步骤,有利于一次性处理大量样品。而且,本制品经过了改良,热处理时间只需15分钟,使用本制品从实验开始至水相回收只需30分钟时间。得到的基因组DNA可以进行PCR扩增及限制酶处理等。
        全套操作约需1小时,分匀浆、细胞裂解、除蛋白、DNA纯化等步骤,详细说明如下。
        匀浆和细胞裂解:
        使用不同的实验材料需采用不同的匀浆步骤,具体说明如下:
        使用研钵进行匀浆时:
       ?、偃?~100mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的研钵中,快速用力展研成匀浆。
        注)下列组织请加液氮研磨至粉末状。
        A.富含DNA酶的胰脏、脾脏、胸腺、淋巴等组织。
        B.富含胶原蛋白的皮肤、肌腱等组织。
        C.富含角质蛋白的组织或坚硬的组织(如骨骼)等。
       ?、诩尤?50μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1,温和研磨30秒钟。
        注)使用上述①-注)的实验材料时,请在加入SolutionA及RNaseA1后,将研钵置于65℃水浴上研磨1分钟。
       ?、凼占?50μl研磨好的组织匀浆液移至CollectionTube中。如果匀浆体积不足650μl,请补充SolutionA至650μl,65℃保温5分钟。
        使用研磨棒进行匀浆时:
       ?、偃?~100mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的CollectionTube中,用研磨棒快速研磨成糊状。
       ?、诩尤?50μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1后用研磨棒快速研磨成匀浆。
       ?、奂尤?50μl的SolutionA将研磨棒上的匀浆冲入CollectionTube中,充分振荡混合后,65℃保温5分钟。

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